奥利亚罗非鱼（Oreochromisaureus），系鲈形目、丽鱼科、罗非鱼属，是原产于非洲的一种热带中小型鱼类，它与尼罗罗非鱼杂交的后代奥尼罗非鱼（奥利亚罗非鱼♂×尼罗罗非鱼♀），具有高雄性率和明显的的生长优势，比双亲生长快20%～30%，因此多用于做生产奥尼罗非鱼的亲本。奥利亚罗非鱼繁殖条件要求低，具有性成熟早、产卵周期短等特点，只要温度适宜，就能在小面积静水水体中一年多次繁殖，在生产上比较容易得到大量的苗种，因此，很少有人对其进行人工繁殖研究。随着我国罗非鱼的养殖不断发展，对罗非鱼的相关研究也不断开展，尤其在罗非鱼的育种方面，如进行雌核发育，科间杂交等，这就需要通过人工繁殖来获得实验材料。由于罗非鱼是一年多次产卵型鱼类，它的性腺发育是非同步性的，进行罗非鱼人工繁殖比较困难，很难获得成熟卵，从而影响罗非鱼相关研究工作的进一步深入。经过几年的摸索，初步掌握了奥利亚罗非鱼人工繁殖技术，2005年进行了6批奥利亚罗非鱼人工繁殖，现将人工繁殖试验情况总结如下。1材料与方法1.1亲鱼来源与培育亲本为淡水渔业研究中心保存的纯种奥利亚罗非鱼，年龄1～3龄，体重150～750g。选择体形完整、体质健壮的做亲鱼，每亩按雌雄比3∶1放养600～800尾。亲鱼放养前每亩施经发酵的粪肥250～500kg培养天然饵料;亲鱼下塘后，投喂饼粕、麸皮、配合饲料等人工饵料，日投饵量为鱼体重的5%左右。另外，定期补充青菜叶、浮萍等青饲料。投饲按"四定"原则，池水保持"肥、活、嫩、爽"。1.2产卵池和孵化设施产卵池为1.2m×0.8m×1.0m的玻璃水簇箱，池水用曝气3d以上的自来水。鱼卵在玻璃培养缸和直径15cm的培养皿中孵化。1.3雌、雄鱼及成熟度的判别雌鱼腹部有三个孔，即肛门、生殖孔和泌尿孔，泌尿孔在生殖突起的顶端，生殖孔开在肛门和泌尿孔之间，为"一"字形的狭长开口，与生殖突垂直。雄鱼只有两个开孔，即肛门和尿殖孔。在繁殖季节，雄鱼体色鲜艳，呈深紫色或紫褐色，背鳍、胸鳍、尾鳍边缘呈艳丽的桔红色，雌鱼体色则呈灰黄色。性成熟的雌鱼在生殖季节性腺轮廓也不明显，性腺成熟好的雌鱼，顺着卵巢方向稍用力挤压，能挤出卵，且卵粒游离，饱满有弹性。如果鱼口中有卵，则是刚产过卵不久，不能用于催产;如果不能挤出卵或挤出的卵大小不均，且粘连在一起，则成熟度不够，不适合催产;如挤出的卵粒无光泽，塌扁，用手轻碰就破裂，则过熟不适合催产。性成熟的雄鱼轻挤腹部，会有透明、稍粘稠的液体从尿殖孔射出。1.4催产与人工授精采用一次注射法，胸鳍基部注射，剂量为雌鱼4mgDOM＋6μgLRH～A/kg，雄鱼减半，每尾鱼的注射量控制在1mL内。催产后的亲鱼按雌雄比1∶1放入水簇箱，每个水簇箱放5～7对亲鱼，增氧泵24h增氧。鱼发情时，将雌、雄亲鱼捞起，用毛巾擦干，将雌鱼卵和雄鱼精液挤入小瓷盆中，用羽毛搅动1min，再加入适量的生理盐水，静止放置2～3min后，倒去生理盐水，然后将受精卵进行孵化。1.5受精卵孵化与胚胎发育观察将受精卵转移到培养皿或培养缸中静水孵化，每个培养皿放卵50～100粒，培养缸放卵200～300粒。每2h用吸管吹动鱼卵1次，发现破卵、死卵立即吸除，定时换水，保持水质清新。胚胎发育观察的材料为人工授精的受精卵，在实验室内孵化并进行连续观察记录。观察期间孵化水温是26～28℃。1.6鱼苗培育鱼苗出膜3d后，腹腔背部出现鳔点，肠管与肛门相通，开始投喂鸡蛋黄、轮虫等或小型枝角类和桡足类，一周后投喂粉状配合饲料。鱼苗开口后7～10d在培养缸中培养，之后放入水簇箱培养，长到2～3cm时放入池塘养殖。2结果2.1亲鱼选择、催产情况从5月30日到8月13日，每隔15d左右做一次人工繁殖试验，共做了6次，每次从400尾雌鱼中能挑选出6～10尾成熟度好的亲鱼。6次共催产雌鱼40尾，25尾产卵，催产率为62.5%。2.2效应时间和产卵行为水温26～28℃时，效应时间为28～36h。产卵前，个体之间因占地盘不停地打斗，雄鱼一般势强，占据水簇箱的下层和水簇箱边角处，雌鱼一般势弱，多被赶到水簇箱上层。快要产卵时，雌鱼生殖孔会突出3～5mm，通常会下沉到水簇箱底部，占据一处，并有做窝行为：不时地将占据处的杂质、脏物衔开。在雌鱼做窝期间，常有雄鱼与之嬉咬、追逐、打转，直到雌鱼产卵，雄鱼排精。卵分数次产出，每次间隔2～3min，产出的卵粒随即吸入口中，鱼卵在雌鱼口腔内孵化。150g的雌鱼产卵1200粒左右。2.3受精卵孵化和胚胎发育奥利亚罗非鱼卵为沉性卵、无黏性，形如鸭梨，充满卵黄，尖的一端为动物极。卵的其长径为2.06～2.40mm，宽径为1.53～1.80mm，卵径大小随亲鱼大小而有差异。受精卵吸水后膨胀，饱满且富有弹性，卵膜透明，在解剖镜下可清楚看到胚胎发育情况。受精卵30min左右形成胚盘，开始细胞分裂，胚胎发育经过胚盘形成期、卵裂期（2细胞期，4细胞期，8细胞期，16细胞期，多细胞期），囊胚期（高囊胚期，平囊胚期）、原肠期（原肠初期，原肠中期，原肠末期）、神经胚期（神经胚期，胚孔封闭期）、器官形成期（视泡形成期，听泡形成期，心脏形成期）、血液循环期、和出膜期。水温26～28℃时，受精卵孵化时间为78～90h，整个胚胎发育期积温约需要2100℃.h。2.4鱼苗培育效果人工条件下奥利亚罗非鱼鱼苗很容易培养，除畸形鱼苗在出膜2～3d后死亡外，正常苗基本都能存活。3讨论与分析由于奥利亚罗非鱼性腺发育不同步，很难选出成熟度合适的雌鱼。在繁殖季节，性成熟的雌鱼性腺要冬成熟度不够，要么刚刚产过卵，成熟度正好的很少，一般选中率只有1.5%～2.5%左右。因此，人工繁殖最好在奥利亚罗非鱼出越冬池后第一次产卵（15d左右）时开始。因为在奥利亚罗非鱼出越冬池后到第一次产卵期间，其性腺发育比较一至，选出成熟度好的亲鱼机率高些。另外，在繁殖旺盛期（6月初到7月底），也能选出较多的亲鱼。选出的亲鱼必须尽快催产，否则就会过熟或自产。使用脑垂体（PC）、绒毛膜促性腺激素（HCG）、地欧酮（DOM）、鱼用促排卵素（LRH-A2）做不同的组合催产奥利亚罗非鱼，结果发现使用DOM和LRH-A2组合催产效果较好，但催产率也只有60%左右，因此，催产剂的组合和剂量还有待优化。奥利亚罗非鱼人工催产效应时间很难把握，选出的雌亲鱼催产效应时间差别较大，这可能是因为其一年多次产卵，性腺发育不一至造成的。亲鱼成熟度好则效应时间短，成熟度差则效应时间长;个体小则效应时间短，个体大则效应时间长，不同的个体，效应时间相差8～10h。一般100g～150g雌鱼催产效果较好。另外，奥利亚罗非鱼发情时的行为也不是特别明显，在人工环境下很难把它们抢占地盘的打斗和发情时的嬉咬分开，只有发现雌鱼开始产卵才能认为是效应时间到了。试验曾用水泥池做产卵池，结果很难发现奥利亚罗非鱼什么时候开始发情产卵，用玻璃水簇箱做产卵池也是为了便于观察它们的活动、产卵情况。雌鱼在快要产卵时有两个前兆，一是生殖孔会突出3～5mm，二是有做窝行为。当发现这两个特征时，说明效应时间快到了，随时都有可能产卵，这时要特别注意。奥利亚罗非鱼卵孵化时间较长，水温在26～28℃时，鱼卵从受精到出膜要78h以上。在孵化期间，鱼卵很容易长水霉死亡。在少量鱼卵孵化时，用曝气的冷开可避免鱼卵长水霉。由于奥利亚罗非鱼卵的卵黄很多，几乎充满整个鱼卵，鱼卵长时间孵化容易破裂，造成卵黄外漏。尤其是在孵化到原肠期后，畸形卵和未受精卵都会破裂，正常的受精卵这时也容易破裂。当孵化水温32℃以上时，即使发育良好的卵也会在孵化前因卵膜破裂卵黄外漏而全部死亡。鱼卵破裂后漏出的卵黄还会使水质迅速恶化，从而引起其它正常鱼卵缺氧死亡。在培养皿、玻璃缸中静水孵化时，要及时把破裂的鱼卵及漏出卵黄吸除，并要经常换水。
