猪的人工授精研究是从公元1780年意大利生理学家司拜伦瑾尼第一次成功在地对狗进行人工授精试验后,直到19世纪末和本世纪初才对马试验成功,然后以用于牛羊猪及其他家畜。到二十世纪30年代,才初步形成一套较完整的操作方法,并从试验阶段进入到实用阶段,成为繁殖改良家畜的重要手段。
猪人工授精的优、缺点
“母猪好,好一窝;公猪好,好一坡。”这句话有力地说明了公猪和母猪在后代的遗传中虽然各占百分之五十的影响力,但在一般自然交配情况下,一头公猪可与许多头母猪配种,而一头母猪只能与一、二头公猪配种,一年产2.0~2.5胎,可见,公猪要比母猪重要得多。若优良的公猪得到充分利用,其对后代的影响将给养猪业带来数倍甚至数十倍的利益。在自然交配的情况下,一头公猪一年最多能负担25~30头母猪的配种任务,显然,公猪的使用效率尚未充分发挥,那么,如何充分发挥优良公猪的作用呢?猪的人工授精技术的广泛应用为此提供了可能。
猪人工授精技术是以种猪的培育和商品猪的生产为目的而采用的最简单有效的方法,是进行科学养猪、实现养猪生产现代化的重要手段。它的优点体现在:
1、提高优秀外种公猪的利用率,节省饲养公猪的饲料和费用。
自然交配一次,公猪的射精量只能配一头母猪,采用人工授精技术,公猪的一次射精量可以配母猪10~30头。在自然交配的情况下,一头公猪一年负担25~30头母猪的配种任务,繁殖仔猪600~800头;而采用人工授精技术,一头优秀的外种公猪可负担400~1500头母猪的配种任务,繁殖仔猪一万头以上。
2、猪人工授精对猪遗传及联合育种的优势。
通过保存优良种公猪或濒危猪种的精液,使公猪的使用不受其生理年限的限制,实现遗传资源的保存;可使种公猪跨群或跨地区使用更为方便、经济、安全,便于引入外源群体的基因;对公猪需求量的减少可增加公猪的选择强度;可以获得大量优良公猪的后代,将它们的优秀基因迅速推广,从而加快遗传进展的扩散速度;通过控制公猪的使用建立一个均衡的群体结构,提高遗传参数及育种值估计效率,和自然交配相比,50%、100% 人工授精分别使10年选择的累积遗传进展提高14%及17%[5]。因此,人工授精在技术上可以解决我国种猪场数量多、规模小的问题,实现猪的联合育种,也是当前我国养猪业提高猪育种效率、完善良种繁育体系的最经济、最有效的手段之一。
总之,通过外种优秀公猪的精液进行人工授精,可以加速猪育种的遗传进展,加大优良基因在猪群中的覆盖率,提高猪群生长速度,降低料肉比,提高出栏猪的均匀度和整齐度,最终把产品质量提升到更高的档次,使我国的猪种在国际养猪业竞争中争得一席之地。大力开展外种猪人工授精技术的应用与推广研究能很迅速安全地使猪场与猪场之间优良种猪以精液的形式进行遗传资源的交流,这样即可在最短的时间内实现较大范围场与场间猪的联合育种。
3、有利于品种布局。
人工授精能充分发挥优良瘦肉型公猪的作用,加快商品瘦肉型猪生产步伐,统一供精可以科学地调整品种布局,做到杂而不乱。
4、克服体格大小的差别,充分利用杂种优势。
在自然交配的情况下,一头大的公猪很难与一头小的母猪配种,反之亦然。有的猪有喜好性,相互不喜欢的公母猪也很难进行配种,这样,对于优秀公猪的保种(要指定配种时)和种猪品质的改良,都将造成一定的困难。对于商品场来说,利用杂种优势,培育肥育性能好、瘦肉率高、体型优秀的商品猪,特别是出口猪,也将会造成一定的困难。而利用人工授精技术,只要母猪发情稳定,就可以克服上述困难,据需要选择配种,这有利于优质种猪的保种和杂种优势作用的充分发挥。
5、减少疾病的传播。
进行人工授精的公母猪,一般都是经过健康检查的猪只,只要严格按照操作规程配种,减少采精和精液处理过程中的污染,就可以减少部分疾病,特别是生殖道疾病的传播,从而提高母猪的受胎率和产仔数。
6、克服时间和区域的差异,适时配种。
自然交配时,由于母猪发情但没有公猪可利用,或需进行品种改良但引进公猪又较困难的现象时时困扰着养猪界人士,而采用人工授精,则可将公猪精液进行处理保存一定时间,可随时给发情母猪输精配种,可以不引进公猪而购买精液(或冻精),携带方便,经济实惠,并能做到保证质量和适时配种,从而促进养猪业社会效益和经济效益的提高。
7、节省人力、物力、财力,提高经济效益。
人工授精和自然交配相比,饲养公猪数量相对减少,节省了部分人工、饲料、栏舍及资金,即使重新建立一座合适的公猪站,总的经济效益还是会提高;若单纯买猪精,将会创造出更多的经济效益。同时,人工授精还是猪场集中断奶、集中配种的重要条件,好的猪人工授精技术条件还可以提高母猪受胎率,因为人工授精所使用的公猪都是经过严格挑选的,且每次采精后都要经过镜检,这是自然交配很难做到的。
人工授精的缺点:如果本身生产水平不高,技术不过关,很可能会造成母猪子宫炎、受胎率低和产仔数少的情况。建议先学技术,后进行小规模人工授精试验,或自然交配与人工授精结合,随着生产水平和技术的不断提高,再进行推广。
猪人工授精技术的效益
这里就猪人工授精与自然交配举一实例作一个成本比较。假如有一个饲养有1000头种母猪的猪场,如采用自然交配,则一头公猪每年能承担25头母猪的配种任务,那么,自然交配需饲养40头种公猪,如采用人工授精,1头公猪可以承担150~400头母猪的配种任务,这里按1头公猪人工授精配250头母猪计算,这样该猪场仅需饲养4头种公猪即可。成本对比计算:以每头公猪全年耗料800Kg,饲料成本至少1500元/年,因此采用人工授精可节约饲料费用5.4万元。以每年淘汰1/3公猪计算,自然交配淘汰13头,人工授精淘汰2头,以每头种公猪4000元购买费计算,人工授精省去购买公猪费用4.4万元。使用人工授精技术每头母猪输精每年大约需要成本费33元(包括一次性输精瓶、输精管、稀释液等费用)。配种1000头母猪需花费3.3万元,综合计算,使用人工授精配种1000头母猪的猪场至少可以节约费用6.5万元,再加上节省建造公猪栏费用、劳工费用等,使用人工授精经济效益是显而易见的。因而,在提高受胎率、稳定产仔数的前提下,人工授精技术的大面积应用推广,将产生丰厚的经济效益和社会效益。
可见,猪人工授精与自然交配相比,其优越性和产生的效益是非常显著的。
猪人工授精操作技术
1、公猪的调教
对于初次用假母猪采精的公猪必须进行调教。调教要有耐心,反复训练,切勿操之过急,严禁强迫、抽打、恐吓等,实践证明,新用的公猪如同后备猪交配1~2次有助于调教,调教的方法有:
①在假母猪后涂抹发情母猪的尿液或阴道粘液,诱引公猪爬跨假母猪,经几次采精后即可调教成功。
②在采精室关一头发情母猪引诱公爬跨后,不让交配,待公猪性冲动至高峰时,迅速赶走发情母猪,再诱导公猪直接爬跨假台畜采精。
③将待调教的公猪关于采精室旁,让其观察熟悉另一头已调教好的公猪爬跨采精,然后诱导其爬跨采精。生产证明,如果一头公猪完成采精后,将另一头公猪赶至假母猪前,多数公猪都会对假母猪表现出浓厚的兴趣,并会仔细地观察假母猪,数分钟后就会爬跨假母猪。
④调教公猪时应特别重视第一次采精,第一次采精要完全并确保公猪不受任何形式的伤害或不良刺激,如果调教公猪半小时都不成功,应将其友善地赶走,等待合适的时候或多关于采精台附近使之熟悉后再试。
2、精液的采集
①采精前的准备
·选择和培养“场内”专家级操作技术人员,在猪场内选择和培养一位或多位承担人工授精技术工作的人员。人工授精的成功需要该人员精确、耐心、自信、仔细且热情和具有钻研的精神,该人员必须熟练的掌握怎样清洁、消毒人工授精技术设备、器械,怎样调教公猪和采集、处理、储存精液,能精确地对母猪进行发情鉴定、适时配种等。
·采精室,采精一般应规范在采精室内进行,当将公猪赶至采精室内即可引起公猪的性兴奋。设计时应保证采精室宽敞,安静,清洁。安设的假母猪要稳定,最好固定在采精室的中间,为防止个别公猪对人的伤害,应在采精室两边设置保护栏。“图一”为一个建议的采精室布置图,供大家实际生产中参考(面积约为3╳3米,实际的采精区域约2.5╳2.5米)。
·台畜的准备,公猪采精用的台畜,生产中我们都称之为假母猪。假母猪有多种设计,根据实际情况可设计为单端式、高低可调节的活动式等等,最简单的做法,做成一条长凳(采精台)即可,且不一定覆盖猪皮,也不必追求猪的形状,长可以为1~1.3米,高50~65厘米,背宽20~25厘米,为便于调教公猪,采精台还可以短些、矮些、轻巧些,制作中多用钢架加木材面子,上面用粗厚的帆布或麻袋覆盖。“图二”即为一个简单的采精台畜式样。
·人工授精实验室及相关采精设备、设施的准备,为便于场内人工授精中准备采精器皿,检测精液、准备精液稀释液及稀释精液,贮存精液,消毒和清洗人工授精器械等,应建立猪场内部的“人工授精实验室”。实际建设中,实验室应尽可能地位于采精室附近,可能的话,应直接同采精室相连以便于快速地处理精液,用一窗口来连接人工授精实验室和采精室有助于增强防疫。人工授精实验室的建设应充分地考虑卫生和防疫的要求,房间的地面要易于清洗,墙面可擦洗,布置可清洗的工作台、污水池和晾干架等。水电齐备,室温可调,有冷热水源为佳。实验室的布置要视具体的操作规程而定。采用小房间易于保持清洁和调节室温。“图三”为某人工授精实验室示意图。其根据操作分为三部分,即湿区(准备稀释液、清洗设备、稀释精液);干区(检查精液);分装区(分装精液,保存精液等)。
·人工授精采精用的设备主要包括:采精瓶(各种不同的容器均可,但最好有保温隔热的效果,要能被消毒,便于清洗);漏斗;消毒外科用纱布;一次性乳胶手套(注意无毒);显微镜(放大倍数可为100、400、1000倍,最好配备有2个目镜,有显微镜保温箱,以便保持精液样本的温度);载玻片;滴管;温度计;各种容量的烧杯、量筒和瓶子(玻璃或塑料的均可,用于准备稀释液、稀释精液以及对精液进行分装等);输精瓶和管嘴;精液保存设施(聚乙烯或聚苯乙烯泡沫藏箱、冷热水袋等,用于精液的短时间存放;恒温控制柜或保温箱);消毒设施(消毒盘或电热网、电热输精导管消毒器械、高压消毒锅等);输精导管;蒸馏水或反渗透水;干燥柜(干燥和存放所有采精和检测设备)。
·条件好的场还应配备:水软化器、比色计或分光光度计、水浴恒温箱、加热器/磁力搅拌器等。
②采精方法:手握法采取公猪精液是目前广泛使用的一种方法,其操作简单、准确、高效。操作过程为采精员戴上消毒手套,立于假台畜一侧,先用0.1%的高锰酸钾溶液将公猪包皮附近洗净消毒,待公猪爬上台畜后,用手揉搓公猪阴茎诱引伸出,并导入空拳的掌心内,让其转动片刻,用手指由轻至紧带着节奏握住螺旋状阴茎龟头部不让其转动。待阴茎充分勃起时,顺势牵伸向前(不要强牵),同时手指有弹性、有节奏地调节压力,结果就会引起公猪射精。射精时停止弹性调节,将手指稍微张开,露出龟头部,让精液射至另一手持的带过滤纱布和保温的集精瓶内。公猪第一次射精停止后,按原姿势不动,又恢复弹性调节挤压即可第二或第三、第四次射精,直至射精全部完结为止。
③采精注意事项
·采精频率:后备公猪每周采精一次,生产公猪采精2次,必要时不得超过3次,严禁频繁采精。
·采精前先将公猪尿囊中的尿液挤去,然后洗净并消毒公猪的包皮部,如阴毛太长,还须剪短。
·采精过程中,工作人员态度要温和,切忌粗暴,操作要规范,小心损伤公猪的阴茎。
·采精过程中前后的稀精及其间的胶体部分应弃去。
·若发现采得的精液品质不好,在保证正常饲养条件下,对该公猪每隔半个月检查一次精液,一个月后再决定去留。
·作好采精记录,认真分析和总结精液品质等情况。
3、精液检查及品质评定
精液检查的目的在于鉴定精液品质的优劣,以便于进一步的处理或用于授精和保存。采精后应立即进行检查,检查要迅速、准确、全面及操作科学、规范。实际生产中,没有必要对每次的每头公猪的精液都进行精子形态检查,但应对新公猪的最初几次精液进行形态检查,以后每头公猪每半个月检测一次。
①感观检查
射精量:通常一头公猪的射精量为150~300毫升,但因品种、年龄、性准备情况以及采精方法、技术水平、采精频率和营养状况等差异很大,变化范围一般为50~500毫升。相应地也可以称量精液的重量(1克约等于1毫升)来衡定其射精量的大小。一般测定公猪的射精量时,不能仅凭一次的采精记录,应以一定时期内多次射精量总和的平均数为准。
颜色、气味:公猪的精液呈淡乳白或浅灰白色,精液乳白程度越浓,表明精子数量越多,如色泽异常,应检查其生殖器官是否有疾病。干净的精液只有一点气味,如受包皮的污染或精液品质异变,则气味很大。
②测PH值
猪的精液PH值为7.3~7.9,测定PH值最简单的方法是用万用试纸比色即可测得。
③活力的检查
活力的检查是精液品质检查的重要项目,活力用来测定精子的运动,活力检查包括评估直线运动的精子比例。操作方法为:用一经过预热到35℃的载玻片,用滴管吸一滴精液,再用盖玻片均匀地盖住液面,这样以便在检查这一薄层精子细胞时就能看到精液的清晰画面。用100或400倍的显微镜来检查并评定精子的活力(如下表),如果活力很差,就评分为0或1,评分为0或1的精液就应弃去。实际操作中为保证测定评估的准确,一般都有要重复检查一次。
精子密度的检查可采用估测法、精子计数法或利用精子的透光性(混浊度)测定。生产中常与检查精子活力时同步进行,在显微镜下根据精子稠密程度的不同,将精子密度粗略地分为“稠密”、“中等”、“稀薄”,简略为“密”、“中”、“稀”三级。镜检下,精子密集,精子间的距离不到1个精子长度,其密度就为“密”;若精子间能容纳1~2个精子,就为“中”;精子间间隙大,能容纳2个以上的精子,则为“稀”。这种评定,与精子活力的评定一样,需要有一定的评定经验,但简单易行,可初略的确定稀释倍数。另外也可利用比色计或分光光度计对精子密度进行准确测定,但设备投入昂贵,一般的生产场难以承受。
④精子形态的检查
精子形态正常与否与受胎率有着密切的关系,如果精液中含有大量的畸形精子,其受精能力就低。一般品质优良的猪精液,其畸形率应在18%以下,品质普通的精液精子畸形率也应不超过20%,如超过20%则表示精液品质不良,应弃去,不作输精用。“图四”为正常精子形态,“图五”为一些常见的畸形精子形态。
⑤其它检查
包括细菌学检查、精子染色涂片、精子存活时间等的检查,这些可根据各生产场的具体条件和生产规模等要求选择开展。
4、精液的稀释及保存
对精液进行品质检查后,为增加精液容量,以生产更多的输精头份,同时也为精液的保存提供良好的营养环境,应立即对精液进行稀释。
①稀释液的准备
可以配制多种适用的稀释液,其中几种相对比较复杂,需借助实验室技术来准备,一般只用于商业化人工授精站。生产中常用的是那些简单且只有一次混合的稀释液,可以购买已配备好的精液稀释液粉剂,按照说明书操作配制即可。比如BTS 、Guelph、 Kiev、 Merck、 Zorpva、 Reading、 Modena等稀释液,它们有的可保存3天,有的可保存5~7天,下表列举了一些稀释液的配方供大家参考。实际配制稀释液时应注意所用的各种化合物都必须是“分析纯”的,加入的蒸馏水必须纯净,条件允许的应用双蒸水稀释;各种物料都应准确称量,且一定要完全溶解,充分混合;稀释液最好是现配现用,最长也应在24小时内用完。
②精液的稀释
稀释精液要根据精子的密度按一定比例进行,如果对精子的密度有准确的测定,其稀释倍数则易于计算。但实际生产中,因投入成本等诸多因素考虑,常只能对精液密度进行“密”、“中”、“稀”的测评。在这种情况下稀释精液时,应控制稀释比例在1:4~1:10,最好控制在6~8头份内,即如果你有200毫升精液,其稀释后的精液容量不能超过1000毫升。且要保证一头份输精液内有1.5×109~6.0×109个精子,且其容量至少应在50毫升以上。最好保证稀释倍数8头份内,因为一头正常公猪一次射精的平均精子数为30~40×109个,变化范围为20~120×109个,如稀释倍数控制在8头份内,仍可确保有足够的精子来保证受精力。
如果精确测定过精子密度,则易于确定稀释倍数,例如测得某公猪精液的密度为2亿/ml,采精量为300ml,且计划稀释后密度为40亿/100ml头份,则此公猪精液可稀释300×2/40=15头份,即需加1500~300=1200ml稀释液。
在对精液进行烯释时,最重要的是在混合时,精液与稀释液的温度要相同,操作中一般都将稀释液加热并维持在36℃,且在稀释时尽量维持精液和稀释液为等温36℃,若有温差也一定要控制在1℃以内。稀释时将稀释液慢慢地倒入精液中充分混合,动作要轻慢,防止剧烈振荡。
③精液的保存
稀释后的精液要保存在恒温箱内,维持温度17~18℃,并每隔12小时轻轻摇动一次以防稀释液出现沉淀现象。生产中要切忌将精液保存在冰箱(2~8℃)或高于20℃的环境中。
人工授精操作技术
输精是人工授精的最后一个技术环节,只有适时准确地将一定量的优质精液输入发情母猪的生殖道内的适当部位,才能获得好的受胎率。
输精剂量不能太少,人工授精的正常剂量一般为30~50亿个精子/1个剂量,体积为80~100ML,美国一般采用30亿/80ML.头份,我国一般采用40亿左右/100ML.头份,不过,这主要是根据实际情况而定,与品种、输精人员的技术水平等密切相关。
实际生产中,为提高猪的受胎率,一般都采用两次输精,即第一次输精后,间隔8~24小时后再重复输精一次。对个别发情持续时间特别长的母猪,除了要细心观察其发情征状变化,掌握输精时机外,还采用多次输精的方法,即连续几天,每天输精一次,以增强其受胎几率。
对母猪进行输精前,还应对保存后的稀释精液进行检查,镜检精子的活力不低于0.5的精液方可用来输精,用于输精的器具必须严格清洁、消毒,从处理室到生产线,要用保温箱携带精液,以免外界温度过高或过低而使精子受到应激死亡。输精前,要对母猪外阴进行清洗、消毒。输精时间掌握在发情开始后的19~30小时左右,实际操作中,最佳输精时间掌握在母猪的盛情期。输精时先将输精管涂以少许稀释液使之润滑,然后向上、向前边逆时针方向旋转边插入,直至锁定在子宫颈内不能前进为止,再向外微微拉动一点,并缓慢地对输精瓶加压,将精液注入子宫内,输精时间的长短要与自然交配相近,约5~15分钟。输完后缓慢抽出输精管,并用手掌按压母猪腰荐结合部,防止精液倒流。