低鱼粉饲料中添加限制性氨基酸对异育银鲫生长及体组成的影响

补充平衡异育银鲫饲料中的限制性氨基酸可对异育银鲫的生长产生显著的影响，提高鱼体可食部分比例，提高生长水平，但晶体氨基酸少量补充到饲料中是否确实存在吸收不同步问题仍值得商阙

□文/图江苏盐城恒兴饲料有限公司 程成荣 付志雄 柏金琪

广东华南农业大学温小波

赢创德固赛（中国）投资有限公司朱选 董延

鲫鱼是我国淡水鱼类中和鲤鱼养殖量相当的水产品种，每年的养殖产量高达250万吨左右，按平均饲料系数2.0计算，饲料需要量近500万吨，拥有巨大的市场发展空间。其中异育银鲫（Carassiusauratus gibelio）具有良好的杂种优势，增产效果明显，且肉质细嫩、营养丰富，离水存活时间长，可在低温、无水条件下进行中短途活鱼运输，是鲫鱼养殖的首要选择品种。

在我国江苏长江以北，鲫鱼饲料蛋白水平普遍较高，销量大的饲料蛋白水平一般为33%，配方中鱼粉用量也较高，这就造成饲料配方成本居高不下。不可否认鱼粉是优质蛋白源，但有限的鱼粉生产量不能满足水产养殖业快速发展的需求，因此生产中常以价格较便宜的植物蛋白源取代鱼粉，但是廉价植物性蛋白取代鱼粉蛋白常导致某些必需氨基酸含量不足。

由于鱼类对蛋白质利用效率在很大程度上取决于蛋白质中氨基酸组成的比例和数量，特别是必需氨基酸的比例和数量(氨基酸平衡模式)，与动物自身组成越一致，其质量越高。前人研究也证明氨基酸平衡可以促进动物生长、节约饲料蛋白质资源、减少含氮物质对环境的污染。如果饲料中缺乏某种氨基酸，则会导致生长不良，饲料转化效率下降甚至造成一些病理上的症状。如饲料中缺乏赖氨酸会导致鲤鳍条腐烂，缺乏蛋氨酸会导致白内障，饲料中赖氨酸和蛋氨酸过量引起的生长和饲料利用下降也有很多报道。

在氨基酸水平方面，到目前为止，鲫鱼的氨基酸需要量还没有系统的报道，相关原料的氨基酸可消化性也基本没有可供参考的数据，因此本次试验主要以市售产品的营养水平为主要基础，通过添加蛋氨酸和赖氨酸，降低鱼粉用量，力求优化配方成本，旨在为鲫鱼饲料的配制生产提供一些理论依据。

一、材料和方法

1、试验饲料

以进口鱼粉、豆粕及棉菜粕为蛋白源，面粉为糖源，豆油和鱼油为脂肪源，配制成6种实用饲料，其中No.1是正常鱼粉用量的对照组，No.2-No.6分别以6%的棉菜粕替代5%的鱼粉，并均补充1%赖氨酸硫酸盐，从No.3至No.6分别添加0.1%，0.2%，0.3%，0.4%晶体蛋氨酸。具体配方如表1所示。

饲料原料均经粉碎过40目筛，经充分混合后经HKJ-218型制粒机加工成2mm的颗粒饲料，晾干后保存备用。

2、试验鱼和饲养方法

异育银鲫为大丰市郊区某池塘当年孵化的同一批鱼，饲养试验在盐城恒兴饲料有限公司研发中心进行，试验鱼用3%的食盐水消毒后在水族箱中训养1周后，选用1200尾体重18.0±0.5g体质健壮异育银鲫随机分箱，在300L玻璃缸水族箱中试验（水体积240L），每组饲料10个重复，每个重复20尾鱼。试验从2009年8月11日开始，10月7日结束，共56天。每天分4次饱食投喂（8：00，11：30，14：00和18：00），实验期间采用连续充气增氧，净化系统的水经沉淀、沙滤池过滤，以除去固体废物。自然光照，养殖用水的生化条件分别为：水温22.0±2.0℃、溶解氧浓度>6mg /L、氨氮<0.02mg/L，pH值为8.4±0.2。

3、样品采集和分析测定

试验结束时停食1天，对各组的试验鱼进行称重，计算存活率，增重率，特定生长率，蛋白质效率，饲料系数等。并在各试验水桶中随机抽取9尾试验鱼，用纱布擦干鱼体表水分，进行解剖，测定其体重、肝脏重、体长，计算肝体比，肥满度等形体指标。同时测定全鱼常规生化组成，其中钙、磷量以干物质计，粗灰分、水分、粗蛋白含量以湿重计。水分测定采用烘箱干燥法，粗灰分采用马福炉灼烧法，粗脂肪采用索氏抽提法，粗蛋白采用凯氏定氮法。

4、数据统计与分析

原始数据经Excel2003初步整理后，经单因子方差分析（ANOVA），之后采用Duncan:s (1955)多重比较检验均值的差异显著性，显著性水平为0.05。数据以（平均值±标准误）形式表示。

二、结果与分析

1、对异育银鲫生产性能的影响

摄食不同限制性氨基酸添加水平饲料56天内异育银鲫的增重率、特定生长率、饵料系数及蛋白质效率等见表2。

由表2可见，饲料中补充赖氨酸及晶体DL-蛋氨酸对异育银鲫的增重率、末体重、特定增长率、饵料系数和蛋白质效率均有影响。补充晶体氨基酸的各试验组（No.2至No.6）的增重率，特定生长率均有显著改善（P<0.05），但对蛋白质效率的影响除了No.6外，均无显著影响（P>0.05），在饲料系数方面，试验No.3至No.6的饵料系数都低于对照组A，而未添加蛋氨酸的No.2的饵料系数却和对照组无显著差异。

总的来说，同时补充赖氨酸和晶体DL-蛋氨酸平衡氨基酸的试验组（No.2至No.6）各项生长指标均得到显著改善。

2、对异育银鲫形体指标的影响

表3显示的是6个实验组的形体指标数值，同时补充赖氨酸和晶体DL-蛋氨酸至赖氨酸2.37%和蛋氨酸0.71%可显著降低脏体比和肝体比（P<0.05），而在肥满度上，平衡氨基酸与否影响不显著（P>0.05）。异育银鲫饲料中平衡赖氨酸及蛋氨酸有助于提高鱼体可食部分比例，增加了其食用价值。

3、对异育银鲫鱼体成分的分析

表4显示的是投喂添加不同含量限制性氨基酸后异育银鲫的全鱼、肌肉和肝脏的生化成份。异育银鲫全鱼灰份，水分和蛋白质含量在添加限制性氨基酸后无任何影响，各组间差异不显著（P>0.05），脂肪含量则以补充较高剂量的试验No.5和No.6显著低于对照组。各试验组的肌肉与肝脏的蛋白质和脂肪含量和对照组相比较无显著差异（P>0.05）。

4、异育银鲫蛋白质效率与饲料中限制性氨基酸不同添加水平的线性关系

根据摄食量数据，可以计算出试验组鱼的特定生长率（SGR）及增重率（WG）和每尾鱼在试验期间平均蛋氨酸摄入量（毫克/尾）相关性，分别如图1，图2所示。

依据增重率和蛋氨酸摄入量的关系，可以推算出获得最大增重时最适的蛋氨酸摄入量为327毫克/尾（按y= -0.0003x2 + 0.196x + 103.34关系求Y最大值时的X值），按本试验中试验组平均摄食量为34.2克/尾计算，蛋氨酸最佳含量应为0.96%，此时赖氨酸含量为2.35%左右。

三、讨论

1、同步吸收问题

水产动物能否利用外源补充的晶体氨基酸，一直以来有不同的观点，但本试验的研究结果给出了很明确与肯定的结论，补充平衡异育银鲫饲料中的限制性氨基酸可对异育银鲫的生长产生了显著的影响，还可提高鱼体可食部分的比例。

关于水产动物不能利用外源补充晶体氨基酸的主要理由是游离氨基酸和蛋白质结合态氨基酸在动物体内吸收不同步，因此推测补充的游离氨基酸不易有效沉积为体蛋白，易在体内氧化而作为能量所利用。但仔细分析原始文献，可以发现这一结论是来自于饲喂纯粹晶体氨基酸混合物和蛋白之间的比较。由于血样中游离氨基酸的浓度存在较大的个体差异，因此要得到可靠的结论必须是基于一定重复基础上的生物统计结果，实际上，很多情况下鱼类摄食后，血液中并不一定总存在必然氨基酸峰值，Ambardekar给初始体重约400克的斑点叉尾鮰分别饲喂玉米蛋白粉、豆粕、次粉、血粉、鱼粉、肉骨粉以及相应的晶体氨基酸混合物（按相应原料中蛋白氨基酸的组成配制），并测定了其后12小时内，血清中氨基酸浓度的变化，结果表明，摄食玉米蛋白粉、血粉和次粉及其分别相应的晶体氨基酸混合物时，血清中各游离氨基酸无峰值出现（P>0.05），摄食肉骨粉时血清中亮氨基酸在第9小时出现峰值（P>0.05），摄食相应的晶体氨基酸混合物则无峰值出现（P>0.05）。而摄食豆粕也无吸收峰，但摄食相应晶体氨基酸混合物时，苏氨酸在第1小时（P<0.05），精氨酸、亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸分别在第3小时出现峰值（P<0.05）并显著高于摄食豆粕时血清中相应的氨基酸（P<0.05），摄食鱼粉时血清中各游离氨基酸浓度也无峰值出现（P>0.05），而摄食相应晶体氨基酸混合物时，血清中赖氨酸在第1小时出现峰值（P<0.05），并显著高于摄食鱼粉时相应的时间的赖氨酸值（P<0.05）。既然有很多时候并没有所谓的吸收峰，因此很多情况下所谓吸收同步性是很难进行比较的。

至今在国内的相关研究中，还没有纯粹摄食晶体氨基酸混合物和结合态氨基酸后，血清中游离氨基酸吸收状况的比较，已有的报道主要是集中在配合饲料中添加少量某一特定晶体氨基酸后，血清中相应氨基酸的吸收时间变化的比较，结论往往是，添加晶体氨基酸后，血清中此种氨基酸吸收峰值提前，但这些结论均不是基于生物统计上的比较。另外非常值得疑问的是，通常仅占结合态氨基酸10%至20%的游离氨基酸如何能改变相应结合态氨基酸的吸收时间？因为从所有这些报道中均没有发现分开的晶体氨基酸峰和结合态氨基酸峰。因此当晶体氨基酸少量补充到饲料中时，是否确实存在吸收不同步问题仍值得商榷。

2、补充晶体氨基酸优化氨基酸水平可以提高水产动物的生长水平

首先要肯定的是，水产动物是可以利用晶体氨基酸的，否则已取得众多氨基酸需要量结果是不可能得到。其次，大量的文献资料也早已证实了这一问题。Lim在罗非鱼饲料以DDGS替代豆粕和玉米蛋白粉时发现，补充0.4%晶体赖氨酸可显著提高鱼的增重水平及饲料效率，和未替代组差异不显著，同样Webster在斑点叉尾鮰(Ictaluruspunctatus)饲料中以DDGS替代豆粕也有相类似的结论。Robinson在以花生粕或棉粕为主要蛋白源的饲粮中补充晶体赖氨酸有效促进了斑点叉尾鮰的生长，Cheng在饲粮中补充晶体赖氨酸和蛋氨酸显著促进了虹鳟（Oncorhynchus m ykiss）的生长水平，

本试验也表明饲料中添加限制性氨基酸后明显有促进异育银鲫的生长，在保持相似蛋白含量水平、减少鱼粉用量时，可利用饲料中添加的游离氨基酸来维持氨基酸平衡，进而提高异育银鲫鱼种的生长性能、饲料转化率及蛋白质效率，节约蛋白资源。国内其它一些学者在一些水产动物上的研究也得到类似的结论，叶元土等认为饲料氨基酸的平衡效果对草鱼的养殖效果有密切影响，其影响规律成正相关关系。刘长忠等报道，适当降低粗蛋白水平，添加合成氨基酸能提高粗蛋白品质，使鲫鱼生产性能达到最佳，在周贤君和黄更生的试验中，也发现异育银鲫和草鱼可有效利用饲料中添加的晶体赖氨酸。颜立成等发现，添加人工合成的蛋氨酸求得对虾饵料氨基酸平衡，减少动物性蛋白的用量，可明显提高养殖效果。季文娟研究黑鲷饲料蛋白时发现，在实际饲料配方中应添加适量赖氨酸和蛋氨酸，以进一步提高配合饲料的蛋白质效率及幼鱼的增重率，降低饵料系数。此外，添加晶体赖氨酸、蛋氨酸对真鲷，鳟类均有显著的促生长作用。

另外非常值得注意是，在本试验我们是直接添加晶体DL-蛋氨酸，而非所谓的"包被"或"包膜"蛋氨酸，从此也可有力的证明，晶体氨基酸由于在饲料加工时，很好的嵌合在饲料蛋白质及碳水化合物基质已足够避免所谓可能存在的"吸收问题"，实际早在1982年就已有研究非常明确的证明，饲料中少量补充晶体氨基酸平衡氨基酸水平时，晶体氨基酸没有必要进行包被，因为此时和给鱼类只摄取纯粹的晶体氨基酸混合物有很大的不同。国内有一些报道总是试图证明少量添加晶体氨基酸会改变相应氨基酸在血液中的峰值出现时间是缺少生理上理论基础，同时所有这些试验结果由于不是基于生物统计而得出，因此可信度值得怀疑。

适当减少鱼粉的用量，直接添加晶体氨基酸以平衡氨基酸水平，不仅节约了蛋白资源，而且还有利于异育银鲫的生长。

3、对异育银鲫生化成分的影响

饲料中限制性氨基酸的添加对鱼体的生化组成影响结果报道不一。鲤的蛋白质含量随着饲料中蛋氨酸含量的增加而增加到最适需求量水平，随后稳定不变，脂肪含量随蛋氨酸含量增加而减少；而长吻鮠、中华鳖的干物质、蛋白、脂肪和灰分含量不受饲料蛋氨酸含量的影响。周小秋等研究表明，饲料蛋氨酸含量对中华鳖的干物质、蛋白质含量没有显著影响，脂肪含量随着饲料蛋氨酸含量增加而增加至最适需求量，随后显著减少。本研究中，添加限制性氨基酸对于鱼体的蛋白质和水分与未添加组并无明显的差异（P>0.05），但高剂量添加组的全鱼脂肪含量有显著下降（P<0.05），因此氨基酸水平对鱼类体组成的影响还不是非常确切，可能具体的试验对象及方法有关。

四、结论

异育银鲫能够效利用晶体氨基酸，其饲料中添加限制性晶体氨基酸平衡氨基酸可有效改善生产性能，晶体氨基酸的添加有助于减少配方中鱼粉用量，减小环境污染，节约蛋白资源，并使饲料成本降低。

参考文献（略）

表1试验饲料配方及营养成分含量（%）

No.1

No.2

No.3

No.4

No.5

No.6

进口鱼粉

豆粕

菜粕

24

24

24

24

24

棉粕

面粉

豆油

鱼油

--

0.4

0.4

0.4

0.4

0.4

膨润土

2.51

2.51

2.51

2.51

2.51

沸石粉

0.39

0.39

0.39

0.39

0.39

谷氨酸

--

0.4

0.3

0.2

0.1

0

赖氨酸硫酸盐*

--

晶体DL-蛋氨酸**

--

0

0.1

0.2

0.3

0.4

磷酸二氢钙

2.3

2.3

2.3

2.3

2.3

预混料***

营养水平（%）

粗蛋白

34.38

34.26

34.48

34.37

34.39

34.45

粗脂肪

5.72

5.43

5.47

5.57

5.46

5.48

总能

3886

3890

3890

3890

3890

3890

赖氨酸

1.93

2.36

2.37

2.29

2.32

2.33

蛋氨酸

0.65

0.61

0.71

0.79

0.89

0.97

精氨酸

2.41

2.41

2.44

2.35

2.38

2.40

组氨酸

0.91

0.83

0.87

0.85

0.88

0.87

苏氨酸

1.28

1.24

1.27

1.24

1.25

1.26

缬氨酸

1.61

1.60

1.58

1.50

1.54

1.53

异亮氨酸

1.38

1.34

1.32

1.27

1.30

1.28

亮氨酸

2.32

2.25

2.28

2.19

2.23

2.23

苯丙氨酸

1.53

1.51

1.53

1.47

1.50

1.49

*：长春大成，赖氨酸有效含量50%

**：德固赛公司，蛋氨酸含量不低于98%

***：盐城恒兴饲料有限公司提供

表2平衡氨基酸对异育银鲫生产性能的影响

组别

No.1

No.2

No.3

No.4

No.5

No.6

初重IBW 克/尾

18.66±0.18

18.74±0.13

18.67±0.13

18.63±0.19

18.64±0.20

18.53±0.14

末重FBW 克/尾

42.88±2.68^a

43.64±3.14^ab

43.70±2.09^ab

44.65±1.91^b

44.07±2.16^b

44.59±0.95^b

增重率WG¹（%）

129.85±15.75^a

132.92±18.88^b

134.06±11.47^c

139.61±9.21^de

136.51±12.41^d

140.71±5.23^e

特定生长率SGR²（%d^-1）

1.43±0.11^a

1.45±0.13^b

1.46±0.08^c

1.51±0.07^e

1.48±0.09^d

1.51±0.04^e

饲料效率FCR³ (g/g)

1.38±0.13^c

1.38±0.13^c

1.34±0.09^a

1.35±0.04^ab

1.34±0.10^a

1.34±0.07^a

蛋白质效率PER⁴(g/g)

2.13±0.22^a

2.13±0.22^a

2.18±0.16^ab

2.23±0.07^ab

2.19±0.16^ab

2.22±0.11^b

表3平衡氨基酸对异育银鲫形体指标的影响

组别

No.1

No.2

No.3

No.4

No.5

No.6

肝体比HSI¹（%）

6.14±1.04^b

5.62±0.59^ab

5.51±0.75^a

5.70±0.59^ab

5.78±0.55^ab

5.65±0.50^ab

脏体比VSI²（%）

14.72±0.87^b

14.91±1.87^b

14.01±0.68^a

13.98±1.06^a

14.32±1.12^ab

14.20±0.92^ab

肥满度CF³（g/cm³）

3.14±0.11

3.13±0.22

3.12±0.12

3.18±0.11

3.18±0.14

3.16±0.11

表4限制性氨基酸添加对异育银鲫鱼体成分的分析

组别

No.1

No.2

No.3

No.4

No.5

No.6

全鱼

水分(%)

70.64±1.02^a

70.02±1.83^a

72.04±1.37^ab

70.41±3.96^a

71.63±3.77^a

72.33±1.86^ab

灰份(%干基)

10.72±0.13

10.60±0.08

11.33±0.13

10.82±0.13

10.46±0.04

10.62±0.98

蛋白(%干基)

48.46±0.18^ab

47.91±0.81^a

50.64±0.50^ab

51.51±0.96^ab

51.79±0.21^ab

49.62±0.61^ab

脂肪(%干基)

25.50±0.11^b

25.74±0.13^b

24.57±0.43^ab

24.24±0.58^ab

23.20±0.13^a

23.63±0.54^a

肌肉

水分(%)

75.17±1.55^ab

76.03±0.24^ab

76.12±0.18^ab

75.76±0.19^ab

75.59±0.31^ab

74.93±1.32^a

蛋白(%干基)

70.02±0.78

69.62±0.18

71.25±0.58

69.99±0.78

70.71±0.71

70.50±0.61

脂肪(%干基)

10.56±0.50

11.22±0.28

10.91±0.82

11.49±0.54

11.22±0.34

11.10±0.27

肝脏

蛋白(%干基)

20.32±0.60^ab

22.85±0.75^b

20.98±0.71^ab

20.60±0.81^ab

19.89±0.46^a

21.03±0.82^ab

脂肪(%干基)

4.25±0.24^ab

4.20±0.36^ab

4.23±0.15^ab

3.48±0.30^a

4.68±0.11^b

3.89±0.15^a