文／海南昌江-南疆生物技术有限公司 王平 李义军 徐安敏 刘荣梅
广东海洋大学水产学院孙成波
日本囊对虾是我国海水养殖的重要品种之一，目前主要采取粗养和半精养，产量相对较低，而且养殖成功率较低，在华南广东、广西和海南三省养殖成功率低于10%。如何开发出日本囊对虾高产、安全和高效的养殖模式，成为调整对虾养殖品种结构，增加经-济效益，维持海水对虾养殖业健康可持续发展的一个关键问题。高位地膜养殖模式是华南地区对虾精养的主要模式，笔者1998年在海南琼山三江-首次采用地膜进行斑节对虾的养殖试验，并采用地膜改造老化虾池取得成功并大面积推广，高位地膜养殖模式用于南美白对虾养殖也取得成功，1999年以来一直进行地膜池养殖日本囊对虾实验，2008年在海南省昌江-南疆生物技术有限公司三联基地进行日本囊对虾高产养殖试验，取得成功。通过试验，建立一套日本囊对虾无特定病原-高产养殖技术。
一、实验地点和条件
1.试验地点：在海南省昌江-南疆生物技术有限公司三联基地选用4口地膜覆沙池（211#、212#、311#、312#），池塘面积均为0.313hm2，进行日本囊对虾无特定病原-养殖高产试验。
2.试验条件：池塘结构为改良的高位地膜池，基本结构与其他提水集约化养殖模式结构相似,主要由5个部分组成, 即提水进水系统、虾池、中央排污排水系统、增氧系统和中间蓄水池处理水系统。提水进水系统包括海水的沙滤池、引水渠或管道、提水动力装置、 虾池进水渠、进水管等。排水系统为虾池中央排污排水共用, 经-排水管汇入总排水渠入海。增氧设备为每亩配备0.75kW水车式增氧机1台, 视池水溶解氧情况开启和关停。中间蓄水池处理水占池塘养殖面积的20%，两个池塘轮流使用。池塘底部采用地膜覆沙，沙层厚度为30-40 cm，防止渗漏和便于彻底清除病原-。养殖过程早期15 d内投喂卤虫无节幼体和天然鱼粉配合投喂，15 d以后采用全人工配合饲料投喂。
3.病原-检测：主要检测白斑综合症病毒（WSSV）、传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）、桃拉综合症病毒(TSV)、黄头病毒（YHV）、感染性肌肉坏死病毒（IMNV）和坏死性肝胰腺炎细菌（NHPB）等6种病原-，采用台湾锐基国际股份有限公司提供的半定量IQ2000TMPCR试剂和方法。半定量IQ2000TMPCR检测法:
试剂配法：第1次扩增反应（FirstPCR）:8μl/reaction, First PCR PreMix 7.5μl,IQzyme DNA Polymerase 2U/μl 0.5μl；第2次扩增反应(Nested PCR): 15μl, Nested PCR Polymerase2U/μl。
反应条件：第1次扩增反应（FirstPCR）：94℃ 2 min；之后再跑94℃ 20 s；72℃ 30 s，重复15圈；末圈之后加跑72℃ 30 s，20℃ 30 s的条件。第2次扩增反应(Nested PCR)：94℃ 20 s；62℃ 20 s；72℃ 30 s，重复30圈；末圈之后加跑72℃ 30 s，20℃成 30 s的条件。再将PCR产物于琼脂凝胶中进行电泳检测，经-荧光紫外成像断定结果后拍照保存结果。
二、试验结果
放苗时间为2008年7月20日，放苗密度112.5万尾/hm2，收虾时间：2008年12月10日开始陆续收获，养殖时间为143-152 d，平均单产5645 kg/hm2，规格100-116尾/kg，产值565030元/hm2，利润为398030元/hm2，饵料系数1.75，成活率55%-60%，养殖成功率100%。养殖对虾没有携带白斑综合症病毒（WSSV）、传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）、桃拉-综合症病毒(TSV)、黄头病毒（YHV）、感染性肌肉坏死病毒（IMNV）和坏死性肝胰腺炎细菌（NHPB）等6种病原-。
三、讨论
日本囊对虾养殖主要控制好以下5个关键点：
1.虾塘的彻底清理和消毒：采用高压水枪冲洗干净地膜上覆盖的沙层，翻耕、暴晒等，整个过程需要1个月左右，然后进水20-30cm，以盖住池底为限，采用有效氯浓度为50-100g/m3的漂白粉或其他含氯消毒剂，彻底杀灭池底病原-生物和携带病原-的宿主生物，24 h后排干池水。然后进水培水。
2.虾苗携带病原-检测：虾苗检测方法和数量。采用半定量IQ2000TMPCR检测WSSV、TSV、IHHNV、YHV、IMNV和NHPB等，采样数量：150尾，分成30个/组，共检测5组，5组均成阴性，可以确认虾苗没有携带上述病原-，达到95%的信度。
3.养殖用水综合处理：养殖用水先经-过沙滤，然后采用有效氯浓度15-20g/m3的次氯酸钠或漂粉精等含氯消毒剂处理养殖用水，余氯消失后采用105-106个/ml的光合细菌或芽孢杆菌进行处理，抑制有害菌的繁殖，72 h可以使用，但是在海水悬浮颗粒过多时需加大光合细菌或芽孢杆菌用量。消毒剂最好轮换使用，以免产生抗药性。
4.饲料的选择与使用：选用优质的饵料，严格控制投饵量，少量多次。放苗早期，一般放苗开始至10d以内，最好采用虾片、卤虫或天然鱼粉等进行营养强化，使用卤虫等活饵料需要进行检测，采用半定量IQ2000TMPCR检测WSSV、TSV、IHHNV、YHV、IMNV和NHPB等携带情况，确认没有携带病原-方可使用。
5.日常管理
1）敌害生物的防除：主要防止蟹类、鸟类和老鼠传播病原-，蟹类一般大型蟹用蟹笼诱捕，小型蟹可用灌石灰于蟹洞中或向蟹洞中投入乙炔块，将蟹杀死。鸟类和老鼠的危害目前只能以防为主，特别是对一些涉禽类，可用加大池塘水位，增大池壁陡度，使这些鸟类无法涉水活动。对于一般吃鱼鸟，则可在池塘边缘插上一些树枝或象形物，吓跑鸟类。积极的办法是派专人看管。
2）中后期养殖用水的处理：配备约占养殖面积的10%-20%面积的蓄水沉淀池，养殖过程采用少量多次添加的的办法，可以添加μ-水或经-过中间蓄水沉淀池处理过的海水。
所有养殖进水包括第一次进水和以后的添换水均需采用处理水，一般采用以化学沉淀法结合生物方法的综合处理措施处理养殖用水，具体措施是先采用有效氯浓度15-20g/m3的次氯酸钠或漂粉精等含氯消毒剂处理养殖用水，72 h后105-106/ml的光合细菌或芽孢杆菌，72 h可以使用，但是在海水悬浮颗粒过多时需加大用量。另外消毒剂最好轮换使用，以免产生抗药性。
3）定期抽检对虾和虾池中浮游生物，及时采取措施：采用半定量IQ2000TMPCR检测WSSV等病毒和细菌情况等，采样数量同虾苗：每池取150个样品，分成30个/组，共检测5组，达到95%的信度。
