人工授精技术可分两类三种方法：第一类为液态精液人工授精技术，又可分为二种方法，①鲜精或1∶2～4低倍稀释精液人工授精技术，一只公羊一年可配母羊500～1000只以上，比用公羊本交提高10～20倍以上。用这种方法，将采出的精液不稀释或低倍稀释，立即给母羊输精，它适用于母羊季节性发情较明显，而且数量较多的地区。②精液1∶20～50，高倍稀释人工授精技术，一只公羊一年可配种母羊10000只以上，比本交提高200倍以上。如江苏省海门市，地处长江三角洲，交通便利，多年来，利用这一技术，全市只有一个改良站制作高倍稀释精液，每乡镇设立输精点，实行统一供精，一只公羊每年配种母羊10000～15000只，精期受胎率可达90%。液态精液如果组织得不好，或在山区及交通不便而母羊较少的地区，会出现精液用不完而浪费的现象。降低了精液的利用率。第二类为冷冻精液人工授精技术，可把公羊的精液常年冷冻贮存起来，在任何地方、时间都可使用。如制作颗粒冷冻精液，一只公羊一年所采出的精液可冷冻10000～20000粒颗粒，可配母羊2500～5000只。精液用多少可解冻多少，不会造成浪费。但受胎率较低，高者在50%以上，低的只有30%～40%，其成本高，效果较差。现将具体操作技术分述如下：一、采精前的准备1.种公羊采精调教一般说，公羊采精是较容易的事情，但有些波尔山羊公羊，尤其是初次参加配种的公羊，就不太容易采出精液来，可采取以下措施：①.同圈法：将不会爬跨的公羊和若干只发情母羊关在一起过几夜，或与母羊混群饲养几天后公羊便开始爬跨。②.诱导法：在其他公羊配种或采精时，让被调教公羊站在一旁观看，然后诱导它爬跨。 ③.按摩睾丸：在调教期每日定时按摩睾丸10～15分钟，或用冷水湿布擦睾丸，经几天后则会提高公羊性欲。 ④.药物刺激：对性欲差的公羊，隔日每只注射丙睾丸素1～2毫升，连注射3次后可使公羊爬跨。⑤.将发情母羊阴道沾液或尿液涂在公羊鼻端，也可刺激公羊性欲。⑥.用发情母羊做台羊。⑦.调整饲料，改善饲养管理，这是根本措施，若气候炎热时，应进行夜牧。2.器械洗涤和消毒人工授精所用的器械在每次使用前必须消毒，使用后要立即洗涤。新的金属器械要先擦去油渍后洗涤。方法是：先用清水冲去残留的精液或灰尘，再用少量洗衣粉洗涤，然后用清水冲去残留的洗衣粉，最后用蒸馏水冲洗1～2次。(1).玻璃器皿消毒：将洗净后的玻璃器皿倒扣在网篮内，让剩余水流出后，再放入烘箱，在115℃下消毒30分钟。可用消毒杯柜或碗柜消毒，价格便宜、省电。消毒后的器皿透明，无任何污渍，才能使用，否则要重新洗涤、消毒。(2).开腔器、温度计、镊子、磁盘等消毒：洗净、干燥后，在使用前1.5小时，用75%液精棉球擦试消毒。3.假阴道的按装、洗涤和消毒先把假阴道内胎(光面向里)放在外壳里边，把长出的部分(两头相等)反转套在外壳上。固定好的内胎松紧适中、匀称、平正、不起皱折和扭转。装好以后，在洗衣粉水中，用刷子刷去粘在内胎外壳上的污物，再用清水冲去洗衣粉，最后用蒸馏水冲洗内胎1～2次，自然干燥。在采精前1.5小时，用75%酒精棉球消毒内胎(先里后外)待用。附：配制75%酒精，用购买的医用酒精，一般为95%浓度，取其79毫升，加蒸馏水21毫升即为75%浓度的酒精。二、采精1.选择发情好的健康母羊作台羊，后躯应擦干净，头部固定在采精架上(架子自制，离地发情通一个羊体高)。训练好的公羊，可不用发情母羊作台羊，还可用公羊作台羊、假台羊等都能采出精液来。2.种公羊在采精前，用湿布将包皮周围擦干净。3.假阴道的准备：将消毒过的，酒精完全挥发后的内胎，用生理盐水棉球或稀释液棉球从里到外的擦试，在假阴道一端扣上消毒过并用生理盐水或稀液冲洗后甩干的集精瓶(高温低于25℃时，集精瓶夹层内要注入30℃～35℃温水)。在外壳中部生水孔注入150毫升左右的50℃～55℃温水，拧上气卡塞，套上双连球打气，使假阴道的采精口形成三角形，并好气卡。最后把消毒好的温度计插入假阴道内测温，温度在39℃～42℃为宜、在假阴道内胎的前1/3，涂抹稀释液或生理盐水作润滑剂(可不用凡士林，经多年实践不用任何润滑剂，不影响公羊射精)。就可立即用于采精。4.采精操作采精员蹲在台羊右侧后方，右手握假阴道，气卡塞向下，靠在台羊臀部，假阴道和地面约呈35度角。当公羊爬跨、伸出阴茎时，左手轻托阴茎包皮，迅速地将阴茎导入假阴道内，公羊射精动作很快，发现抬头、挺腰、前冲，表示射精完毕，全过程只有几秒钟。随着公羊从台羊身上滑下时，将假阴道取下，立即使集精瓶的一端向下坚立，打开气卡活塞，放气卡取下集精瓶(不要让假阴道内水流入精液，外壳有水要擦干)，送操作室检查。采精时，必须高度集中，动作敏捷、做到稳、准、快。5.种公羊每天可采精1～2次，采3～5天，休息一天。必要时每天采3～4次。二次采精后，让公羊休息2小时后，再进行第三次采精。三、精液品质检查精液品质检查项目很多，这里只介绍几种常用的项目①.肉眼观察：正常精液为乳白色，无味或略带腥味。凡带有腐败味，出现红色、褐色、绿色的精液均不可用于输精。公山羊正常的射精量范围是0.5～2.0毫升，平均为1.0毫升。②.精子活率检查在载玻片上滴原精液或稀释后的精液1滴，加盖玻片，在38℃显微镜温度下(可按显微镜大小，自制保温箱，内装40瓦灯泡1只，既照明又保温)检查。精子运行方式：有直线前进运动，回旋运动和摆动三种。评定精子活率以直线前进运动精子百分率为依据，通常是用十级评分法。大约有80%的精子做直线前进运动的评为0.8，有60%精子做直线前进运动的为0.6，依次类推。山羊原精液活率一般可达0.8以上。但新引进的波尔山羊第一年使用活率往往较差,原精活率只有0.6,第二年就提高了。在检查(评定)精子活率时，要多看几个视野，并上下扭动显微镜细螺旋，观察上、中、下三层液层的精子运动情况，才能较精确的评出精子的活率。③.密度检查估测法：在检查精子活率的同时进行精子密度的估测。在显微镜下根据精子稠密程度的不同。将精子密度评为“密”、“中”、“稀”三级、“密”级为精子间空隙不足一个精子长度，“中”级为精子间有1～2个精子长度空隙，“稀”级为精子间空隙超过2个精子长度以上，“稀”级不可用于输精。精小计数法：用血细胞计算板较精确的计算出每毫升精液中的精子数，在精液高倍稀释时，要以精子数和精子活率来计算出精液稀释倍数。计算方法是：用红细胞吸管、取原精液至0.5刻度处，再吸入3%的氯化钠溶液至101刻度处，将原精液稀释200倍。以母指及食指分别按吸管的两端摇均，然后弄去吸管前数滴，将吸管尖端放在计算板与盖玻片之间的空隙边缘，使吸管中的精液流入计算室(高0.1毫米)，充满其中。计算板中央用刻线分成25个正方形大格，共由400个小方格组成，面积为1平方毫米。在200、400倍显微镜下数出五个大方格(四角各一个，再加中央一个大方格，共80个小方格)内的精小数。计算时以精子头部为准，位于大方格四边线条上的精子，只数相邻两边的精子，避免重复。数出四个大方格的精子总数后加7个。即为1毫升原精液的精子数。每毫升山羊精液中含精子数为10～50亿，平均为30亿。精子计数可10～15天进行1次。有条件的地方可用密度仪器测定。四、液态精液稀释配方与配制1.精液低倍稀释的稀释液，在精液采出后，原精数量不够时，可作低倍稀释，密度仪器测定。满足需要，并在短时间内使用，稀释液配方可简单些。如生理盐水；奶类稀释液：用鲜牛、羊奶，水浴92℃～95℃消毒15分钟,冷却去奶皮后即可使用。凡用于高倍稀释精液的稀释液,都可作低倍稀释用。2.精液高倍稀释的稀释液，不但是为了扩大精液量，而要延长精子的保存时间，配方很多，现介绍2个稀释液。(1)葡萄糖3克，柠蒙酸钠1.4克，EDTA(乙二胺四乙酸二钠)0.4克，加蒸馏水至100毫升，溶解后水浴煮沸消毒20分钟，冷却后加青霉素10万单位，链霉素0.1克，若再加10～20毫升卵黄，可延长精子存活时间。(2)葡萄糖5.2克、乳糖2.0克、柠檬酸钠0.3克，EDTA0.07克，三墓0.05克，蒸馏水100毫升，溶解后煮沸消毒20分钟，冷却后加庞庆大霉素1万单位，卵黄5毫升。五、液态精液稀释原精液活率在0.6以上万可用于稀释输精。1.精液低倍稀释，原精液量够输精时，可不必再稀释，可以直接用原精直接输精。不够时按需要量作1∶2～4倍稀释，要把稀释液加温到30℃，再把它缓慢加到原精液中，摇匀后即可使用。2.精液高倍稀释，要以精子数、输精剂量、每一剂量中含有1000万个前进运动精子数，结合下午最后输精时间的精子活率，来计算出精液稀释比例，在30℃下稀释(方法同前)。六、分装、保存和运输精液低倍稀释，就近输精，把它放在小瓶内，不需降温保存，短时间用毕。1.分装保存(1)小瓶中保存；把高倍稀释清液，按需要量(数个输精剂量装入小瓶，盖好盖，用蜡封口，包裹纱布，套上塑料袋，放在装有冰块的保温瓶(或保存箱)中保存，保存温度为0℃～5℃。(2)塑料管中保存：作者等把精液以1∶40倍稀释，以0.5毫升为一个输精剂量，注入饮料塑料吸管内(剪成20厘米长，紫外线消毒)，两端用塑料封口机封口，保存在自制的泡沫塑料的保存箱内(箱底放冻好的冰袋，再放泡沫塑料隔板，把精液管用纱布包好，放在隔板上面，固定好)盖上盖子，保存温度大多在4℃～7℃，最高到9℃。精液保存10小时内使用，这种方法，可不用输精器了，经济实用。2.运输不论那种包装，精液必须固定好，尽可能减轻振动。若用摩托车送精液，要把精液箱(或保温瓶)放在背包中，背在身上。若乘汽车送精液，最好把它抱在身上。七、冷冻精液制作技术制作冷冻精液，要有很多设备，好在各省、区都有精液冷冻站，可用它来兼冻波尔山羊精液，不需增加设备，有的站已经开始冷冻波尔山羊精液，并取得较好的效果。作者等研究成功的80年代在北京市门头沟区冷冻绒山羊精液，获得情期受胎率73%的好结果，现介绍给大家，供参考。1.稀释液配方与配制Ⅰ液 葡萄糖3克、柠檬酸钠3克，加蒸馏水至100毫升，溶解后，水浴煮沸消毒20分钟，冷却后加青霉素10万单位，链霉素0.1克，取80毫升加卵黄20毫升。Ⅱ液 取Ⅰ液44毫升，加甘油6毫升。2.精液冷冻制作采出的精液，检查活率在0.6以上者即可冷冻，在30℃下用Ⅰ液(30℃)进行1∶1.5倍稀释，包上8层纱布放在4℃冰箱中预冷降温2～小时，在4℃下加与Ⅰ液等量的含甘油的Ⅱ液，摇匀，最终稀释比例为1∶３倍稀释，立即在氟板上滴冻成0.1毫升的颗粒。取本稀释液Ⅰ液94毫升，加甘油6毫升，合成一液，就可以冷冻细管精液。八、母羊发情鉴定1.以母羊发情外部表现来判断母羊发情本地母山羊发情外部表现较明显，发情时发出叫声，食欲减退，兴奋不安，对外界刺激反应敏感，摇头摆尾，有交配欲，喜欢接近公羊，在公羊追赶爬跨时常站立不动，让公羊交配；阴门肿大，流出粘液。从母羊发情的外部表现来判断母羊是否发情是比较容易的。但养羊户往往不注意，就不能确知母羊的发情开始时间，给适时输精造成困难。2.试精用试精公羊试情，能准确找出发情母羊，做到适时输精。最简便的方法是，在试情前将公羊腹部带兜上试情布(长40～45厘米，宽35～40厘米，四角缝上25～30厘米长的带子)，每日早晨一次或早晚各一次将公羊放入母羊群中试情。当母羊接受公羊爬跨，站立不动，或母羊围着公羊旋转，并不断摇尾，都是母羊发情的表现，及时把它抓出，待配。3.试情公羊选择和饲养管理试情公羊必须选择体质结实、健康无病，性欲旺盛，动作灵敏的1～5岁公羊。试情公羊与母羊的比例以1∶30～40为宜。在配种前一个月驱虫，加强饲养管理，除放牧采食或舍饲喂草外，每天补饲0.2～0.3公斤混合精料。每隔10～15天，给试情公羊排精一次，增强性欲。九、输精1.输精时间适时输精，对提高母羊的受胎率十分重要。山羊的发情持续时间为24～48小时。排卵时间一般多在发情后期30～40小时。因此，比较适宜的输精时间应在发情中期后(即发情后12～16小时)。如以母羊外部表现来确定母羊发情的，若上午开始发情的母羊，下午与次日上午各输精1次；下午和傍晚开始发情的母羊，在次日上下午各输精1次。每天早晨1次试情的，可在上下午各输精1次。2次输精间隔8～10小时为好，至少不低于6小时。若每天早晚各1次试情的，其输精时间与以母羊外部表现来确定母羊发情相同。如母羊继续发情，可再行输精1次。2.母羊保定本文介绍一种不需输精架的倒立保定法，它没有场地限制，任何地方都可输精。保定人将母羊头夹紧在两腿之间，两手抓住母羊后腿，将其提到腹部，保定好不让羊动，母羊成倒立状。用温布把母羊外阴部擦干净，即待输精3.输精方法(1).子宫颈口内输精：将经消毒后在1%氯化钠溶液浸涮过的开膣器装上照明灯(可自制)，轻缓地插入阴道，打开阴道，找到子宫颈口，将吸有精液的输精器通过开膣器插入子宫颈口内，深度约1厘米左右。稍退开膣器，输入精液，先把输精器退出，后退出开膣器。进行下只羊输精时，把开膣器放在清水中，用布洗去粘在上面的阴道粘液和污物，擦干后再在1%氯化钠溶液浸涮过；用生理盐水棉球或稀释液棉球，将输精器上粘的粘液，污物自口向后擦去。(2).阴输精：将装有精液的塑料管从保存箱中取出(需多少支取多少支，余下精液仍盖好)，放在室温中升温2～3分钟后，将管子的一端封口剪开，挤1小滴镜检活率合格后，将剪开的一端从母羊阴门向阴道深部缓慢插入，到有阻力时停止，再剪去上端封口，精液自然流入阴道底部，拔出管子，把母羊轻轻放下，输精完毕，再进行下只母羊输精。装在小瓶中保存的高倍稀释精液，要用输精器吸入后再输精(余下精液仍在0～5℃下保存)，可作子宫颈口内或阴道输精。液态精液情期受胎率方，80%以上。有人做过试验，阴道输精的情期受胎率比子宫颈口内输精的降低不到2%。所以说情期液态精液可以阴道输精，而且塑料管又可代替输精器，便于推广应用。冷冻精液必须进行子宫颈口内输精，否则会降低受胎率。有条件用腹腔镜子宫角内输精，能使冷冻精液受胎率提高。4.输精量原精输精每只羊每次输精0.05～0.1毫升，低倍稀释为0.1～0.2毫升，高倍稀释为0.2～0.5毫升，冷冻精液为0.2毫升以上。5.冷冻精液解冻解冻好坏对解冻后活率有很大影响。本人采用40℃水温解冻颗粒精液，先把小试管用维生素B12(每支含0.5毫克)冲洗一下，留一点B12，并快速在40℃水中摇动至2/3融化，取出试管继续速摇至全部融，解冻后活率较好，可试试。另外，建议做一个泡沫塑料小盒，倒上液氮，再把冷冻精液袋放入氮液中，这样可避免未解冻的颗粒精液，因升温又入液氮降温，影响活率。十、所需器材、药品、用品、表格1.所需器材、药品、用品所需物品大部分已在文章中提到了。用于配制稀释液的药品、试剂：如葡萄糖要一水的、柠檬酸钠、EDTA(乙二胺四乙酸二钠)都要分析纯的，青、链霉素不要过期的，卵黄需新鲜鸡蛋，要用不加水的鲜奶。假阴道内胎，玻璃器皿易破损的物品要多准备一些。显微镜保温箱、开膣器照明灯、精液保存箱等能自己做的尽可能自己做，在实践中要有所创新。如要开展冷冻精液输精，要配备好液氮罐。2.表格有种公羊精液品质检查表；母羊配种记录表；精液使用登记表，及日常事务记录等，各项记录必须按时、准确填写。是为了统计分析，总结经验，改进工作。十一、建立人工授精站和输精点地处平川的，可象江苏省海门市那样全市就改良站制作高倍稀释精液，负责统一供精，每个镇兽医站设一个输精点，负责农户母羊输精。地处山区的，可划片建立人工授精站，全县可建2～3个人工授精站，在乡镇或母羊多的村设输精点。若采用冷冻精液输精，县里又无精液冷冻设备，人工授精站可统一购买冷冻精液，转给各乡镇输精点，每点配备液氮罐，由人工授精站定期到各输精点添加液氮。有条件地地方也可购置冷冻精液设备，饲养波尔山羊公羊，自己制作冷冻精液，也是可以的。但不能提倡，因为我国现有冷冻精液设备，已够用的了。还可在配种季节，季节性的集中母羊，建立短期的人工授精站，采用鲜精或低倍稀释精液输精，到配种季节末结束。各地可根据具体情况，采用、创新。 1.建立人工授精站的条件和基本建设人工授精站应建立在背风、向阳、干燥、有水源、牧草地面积大或有较多的农田，无疾病流行史，交通便，母羊数量多，又是一县的中心地带，这样便于每天送或取精液，因为高倍稀释精液，当天精液只能当天使用，第二天使用就要降低受胎率，就得天天取送精液，设在边远地区就不方便了。人工授精站设有：采精室(兼作输精室)、精液处理室(要有顶棚)、公羊圈舍、母羊圈、饲料间、兽医室、工作人员宿舍等。 2.建立输精点的条件设在母羊较集中，交通较方便的地方，把点设在乡、镇兽医站也可以，不论是用摩托车还是乘公共汽车取或送精液，在上午10时前精液必须到各输精点，这样单程不能超过2小时，山区最远点距人工授精站20～30公里，平川可远到50公里以外。各地可根据当地的具体条件来建点。输精点设有：输精室、母羊舍(供发情母羊过夜)、工作人员宿舍等。
