l 黄曲霉毒素的产生
1.1黄曲霉毒素的来源及理化性质
黄曲霉毒素是本世纪60年代初发现的一种真菌的有毒代谢产物,由曲霉属中的黄曲霉和寄生曲霉所产生。黄曲霉作为贮藏菌广泛分布于自然界,寄生曲霉在我国罕见,它是以寄生方式存在于热带和亚热带地区甘蔗或葡萄的一种害虫——水蜡虫体内。在自然界,黄曲霉的生长要求不高,在有氧条件下,花生和玉米是最好的繁殖场所,据报告可能
与其富含微量元素锌及能够刺激黄曲霉繁殖的生长因子有关。在25~30℃下,容易产生黄曲霉毒素。
黄曲霉毒素是二块呋喃香豆的衍生物,依据化学结构的不同和产生的衍生物有20余种,黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q1等17种相关化合物已经过系统鉴定其结构。但饲料中污染的黄曲霉毒素是B1、B2、G1、G2等四种,黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃氧杂奈邻酮,但化学结构不同的黄曲霉毒素的毒性有所差异,其中B1最强,然后依次是:M1>G1>B2>M2>B2。 黄曲霉毒素耐热,B1毒素在268~269℃时才分解。高压0.103Mpa(120℃)2h降低1/3~l/4,4h降低1/2。加入强碱和5%次氯酸钠可完全破坏。黄曲霉毒素(主要是B1、B2、G1、G2)可溶于多种有机溶剂中(如氯仿、丙酮、甲醇和乙醇),但不溶于己烷、石油醚、水与乙醚中。在紫外线激发下,毒素发出很强的荧光。如B1和B2经层析在紫外线下发出紫兰色荧光;G1和G2发出黄绿色荧光,低浓度的纯毒素易被紫外线降解。
在黄曲霉毒素的产生过程,温度是一个很重要的条件,温度过高过低,对霉菌的产毒都有很大的影响,一般产生G1毒素的温度略高于B1毒素。
1.2饲料中产生黄曲霉毒素的原因
1.2.1环境温度和湿度
黄曲霉的生长繁殖需要一定的温度、湿度条件,25~30℃是最适生长温度,最适相对湿度为80%~90%。由此可见,黄曲霉的生长繁殖与一定地区的气候条件是密切相关的。在众多的饲料发生霉毒的地区来看,南方地区都要高于北方,这是因为南方的气温、湿度更适合于黄曲霉的生长繁殖,特别是梅雨季节,黄曲霉容易生长。
1.2.2饲料原料水分含量
玉米、麦类、稻谷等谷实饲料原料的水分含量为17%~18%时是黄曲霉生长繁殖的最适条件。谷实类在粉碎后如果水分含量过高则更适合黄曲霉的生长。因此,饲料原料的含水量应控制在防霉含水量以下。
l.2.3仓库和管道污染
如果饲料原料长时间仓储或仓库潮湿、漏雨,库存过多而不注意通风、干燥、打扫卫生,特别是已经粉碎的物料,由于它颗粒小,容易吸收周围的水分,就很可能为黄曲霉的生长繁殖创造一定的温度和湿度。其次,颗粒饲料的生产中要注意冷却和配套风机的选择,否则易造成颗粒冷却时间不够或风量不足,出机饲料水分、温度过高而黄曲霉的生长。最后,要定期清理颗粒料提升料斗或管道中形成的霉积料。
1.2.4运输管理
饲料运输过程中若管理不当,以致饲料受淋。受潮、曝晒、通气不当、堆压时间过长也会为黄曲霉毒素的产生创造有利的条件。
2防 治
2.1对原料的防治措施
尽量选择对霉菌敏感性不强的饲料作物:收获和储运过程中应尽量避免磨破、压碎、鼠啃、虫咬,特别是避免玉米、花生等谷物的表皮和外壳损伤。破碎的花生易污染黄曲霉。贮藏室应避免过湿、通风不良及堆放过多过久。
2.2原料采购中的防治措施
原料采购是饲料企业产品质量优劣的第一关。因此,采购管理至关重要。第一要努力提高采购人员的综合素质(如原料知识、原料管理知识、敬业精神)。采购人员应严格按国际标准及企业标准来采购原料,对于已被黄曲霉毒素污染或可能被污染的原料一律不能收购,切勿低价收购不合格原料。第二,采购人员要对原料的营养指标、水分含量进行严格的验收。特别是水分含量问题,众所周知,玉米是成品料的主要原料,玉米水分含量的高低直接影响到成品料的水分含量。南方地区的梅雨季节时,一般原料的水分含量应低于12.5%,玉米、高粱、稻谷的水分含量应控制在14%以下。
2.3原料贮存时的防治措施
原料贮存也是一个重要问题,如果仓库漏水、阴暗、潮湿、老鼠出没就很容易促使黄曲霉生长,因而影响产品质量。在原料贮存中,一定要注意空气、湿度、温度等的控制,要严格按照“先进先出”的使用原则,要及时清理已被污染的原料,可使用的方法有:控制贮存环境的温度、封闭隔氧贮存、气调贮存、低温通风贮存及辐射法,例如把脱粒后的湿玉米装入内衬塑料袋的麻袋,装满并扎紧袋口可抑制黄曲霉的生长,也可以添加防霉剂(如丙酸及其盐类、山梨酸及其盐类、双乙酸钠等)。 2.4 饲料生产过程中的防治措施
首先是湿度问题,我国对饲料产品中的水分含量已有明确的规定:①猪、鸡配合饲料的水分含量在北方不高于14%,在南方不高于12.5%。但如果平均气温在10℃以下的季节或出厂到饲喂期不超过1O天或配合饲料中添加有规定量的防霉剂的话,水分含量可以增加0.5%;②猪、鸡浓缩饲料的水分含量在北方不高于12%,南方不高于10%。在颗粒饲料生产中:第一,要控制好蒸汽质量和输送蒸汽管道的长度,以防止冷凝水进入调质器,蒸汽压一般应控制在0.35~0.4MPa,水分控制在15%~16%之间较好;第二,要注意调质时间,一般应控制在10~30min,调后的粉料水分不超过10%为好,或调后的含水量和调前的相差应小于0.5%;第三,要选好冷却设备,控制好冷却时间和冷却温度;第四,装袋前要严格检测饲料的含水量。
其次是温度问题,要注意控制蒸汽的温度(80±2℃);要注意冷却时间和通风量以及对冷却后颗粒料温度的推测,防止料温与室温相差过大,料温应高3~5℃。 2.5饲料贮存中的防治措施
仓库要通风、阴凉、干燥、清洁没有霉积料,其次堆入要规范,应与窗、壁保持一定的距离,贮存时间长的话还要定期翻动通风。再次是防霉剂的使用。现在多用丙酸盐类防霉剂,如克霉灵、除霉净、霉敌101、露保细、万路保、克霉霸、露保细盐、露保细NC、万香保,具体使用方法是:密封包装的含水量12.5%~13.5%的颗粒料贮存1个月以上,应添加0.3%的丙酸钙。水分在11.55%~12.5%的粉料贮存2月以上的则加丙酸钙0.15%。南方地区由于雨水较多,3~5月间最好添加0.2%~0.4%的丙酸钙或丙酸钠。除丙酸及其盐类外,还可用山梨酸及其盐类,苯甲酸和苯甲酸钠,甲酸和甲酸钠、甲酸钙。目前国际上多采用复合型的防霉剂,如万香保、克霉霸等。
2.6饲料运输中的防治措施
装车时要保证车箱里没有水、不潮湿,运输时最好盖上防雨用具如帆布,一者可以防雨水,二者可以防阳光曝晒;卸车时应注意将最上层的饲料或已被淋湿或破袋的放在最后堆,以便早点用掉。
2.7饲料企业员工的管理
饲料企业要定期给采购员。生产、运输一线的员工进行知识教育和宣传,提高他们对黄曲霉毒素的认识,防微杜渐,环环相扣,以生产出质量高的饲料来。同时,饲料企业也要尽量在原料客户、饲料客户中广泛宣传黄曲霉毒素对人、对畜的危害性,告诉他们如何采取措施防霉,这是一个企业容易忽视的问题也是一个防止黄曲霉毒素污染的有效措施。
3黄曲霉毒素污染饲料、原料的检测和处理
3.1检测
平时加强饲料或原料的检测是防止黄曲霉毒素流入食物链的重要措施,严禁饲喂已污染的饲料或使用已污染的原料。我国饲料原料(花生饼、玉米)中黄曲霉毒素B1的允许量不超过50mg/kg。在发生猪黄肝病地区的饲料中,黄曲霉毒素B1的检出率高达58.3%,花生饼污染黄曲霉毒素B1的最高含量竞达24~40mg/kg。现简述黄曲霉毒素B1的检测方法。该方法参照国际标准ISO6651~1983(E)《饲料中黄曲霉毒素B1的测定方法》,适用于各种单一饲料和配合饲料,其原理是样品中黄曲霉毒素B1经提取、柱层析、洗脱、浓缩、薄层分离后,在波长365nm紫外线灯光下产生蓝紫色荧光,根据其在薄层上显示荧光的最低检出量来测定其含量。在检测时特别要注意的是:必要时要使用防毒面具和胶皮手套,实验台使用器具等在每次使用后均要用0.5%~l%的次氯酸钠溶液清洗、擦试,手上若沾有黄曲霉毒素时,也要用次氯酸钠溶液和肥皂充分洗净。
3.2脱毒处理
轻度污染的饲料或原料经脱毒处理使毒素含量符合卫生标准后可利用。主要的脱毒方法有:
3.2.l除去法
主要是采取挑选霉粒、加工去毒,要水洗、可浸泡也可用吸附剂如活性炭、膨润土、沸石、硅藻土或甘露寡糖来吸附,去毒效果不错(如表1),经脱毒处理后的日粮中黄曲霉毒素不超过50mg/kg就可作为猪饲料。
3.2.2灭活法
常用的有三种,①加热处理法:黄曲霉毒素虽然对热稳定,但在高温下也能部分分解,例如将含有7000pg/kg黄曲霉毒素的潮湿花生粉在0.103Mpa、120℃高压处理4h,其含量可下降到340μg/kg;②碱炼法:原理是破坏黄曲霉毒素的内酯环使之失去毒性,花生、玉米均可用此法;③石灰溶液和盐类去毒,首先用石灰乳水、纯碱水或草木灰水浸泡整粒的污染黄曲霉毒素的玉米2~3h,然后用清水冲洗至中性,两小时后烘干,去毒效果可达60%~90%。