1、抹片镜检
取病死鸡只的肝、心血抹片镜检，均见到两端稍圆，单个存在的小杆菌，多数菌体呈典型的两极着色。
2、病鸡剖检
急性患病鸡剖检时，可见心外膜有小出血点，皮下组织和腹部脂肪、肠系膜、浆膜等处常有小出血点。肺脏质脆、呈棕色或黄棕色。慢性患病鸡剖检可见关节、腱鞘、卵巢等发炎和肿胀。
3、涂片镜检
取病死鸡的肝、脾制成匀浆，接种于血琼脂平皿上，37℃培养24后，长出的菌落较小，圆形光滑，呈淡灰色，粘稠状，如露珠样，不溶血。涂片染色镜检时呈革兰氏阴性。
4、小鼠接种试验
将鸡病料用生理盐水作10倍稀释，皮下接种2组小鼠(每组2只)。组每只注射0.2毫升，第二组每只注射0.1毫升，对照组每只皮下注射无菌肉汤0.2毫升。结果试验组的小鼠分别于注射后14-20、16-24死亡，对照组则健活。死亡小鼠取样镜检，均有上述形状的小杆菌存在。
5、鸡只接种试验
将鸡病料用生理盐水作10倍稀释，静置20沉淀后，将上清液皮下注射健康鸡4只，每只0.2毫升。鸡只注射后1-3天内全部发病死亡。其临床症状与上述鸡群表现相同。剖检后分离培养到与原病料相同的小杆菌。
