1 球虫卵检查
取病死鸡有出血点的肠管部分，采用饱和盐水漂浮法，通过镜检可见到数量不等的球虫卵囊，卵囊呈无色或黄色，圆形或椭圆形，确诊为球虫感染。
2 涂片检查
取肠粘膜刮取物制成涂片，革兰氏染色可见短粗的革兰氏阳性的大杆菌，两端钝圆、单个散在或成对存在，亦可见形成短链。瑞氏染色可见有的荚膜，无鞭毛，不能运动。
3 细菌培养
无菌取病死鸡肝脏接种于血液琼脂平板，分别在有氧和厌氧条件下进行培养，37℃24后，有氧环境中的血液琼脂平板上无菌落生长;厌氧环境中的血液琼脂上形成圆形、光滑的菌落，直径2～4mm，周围有两条溶血环，内环完全溶血，外环不完全溶血。初步判断为魏氏梭菌。
4 药敏试验
将菌落接种在血液琼脂平板上，进行纸片法药敏试验，37℃培养24，对抑菌圈大小进行测量比较。结果表明该细菌对新霉素、丁胺卡那、粘杆菌素高度敏感，对环丙沙星、强力霉素、阿奇霉素中度敏感，对阿莫西林、恩诺沙星、氟苯尼考、头孢噻肟、洛美沙星耐药。
通过临床症状、剖检变化和实验室诊断，确定为坏死性肠炎与球虫病混合感染。
