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鸡病常用的实验室诊断方法

时间 : 08-06 投稿人 : 难拥 点击 :

一、抹片镜捡:适用于诊断鸡曲霉菌病和球虫病等。诊断曲霉菌病时,取肺部或气囊上的结节病灶,置破片上,用另一玻片压碎、抹簿,必要时加一滴清水,在低倍显微镜下观察有无菌丝和袍子。诊断球虫病时,在病变肠段刮取粘膜少许,或取内容物少许,置琐片上,抹薄,加一二滴清水,于低倍微镜下观察有无卵囊和裂殖体。

二、染色片镜检:适用于禽霍乱等细菌性传染病的诊断,分为制片、染色、镜检三个步骤。

鸡病常用的实验室诊断方法 | 动物养殖学堂

第一制片:以无菌操作剪下一小块肝或脾,将切面在无菌玻片上轻压一下,留下压迹,晾干。这样制作的标本称为触片。如果检验血液或其它液态病料,则用无菌玻片的一端蘸取少许病料,在另一无菌破片上均匀推出一条薄的涂面,晾干。这样制作的标本称为涂片。触片或涂片制好后,要用火焰固定,即在酒精灯火焰的上方迅速地来回通过3—4次,使片温大约达到60℃.便起到固定作用。

第二染色:方法有很多种,常用的为美蓝染色和革兰氏染色。

美蓝染色:以美蓝(亚甲蓝)的饱和酒精溶液30毫升加苛性钾水溶液(1:10000)100毫升,即配成染色液(平时配好备用)。将染色液滴于触片或涂片上,约2分钟,倾去,再用水冲洗,用吸水纸吸干,即可镜检。此法简单,但不能分辨病菌是革兰氏阳性还是阴性。

革兰氏染色:革兰氏染色分四步进行。

第一步:用0.5%结晶紫水溶液滴于触片或涂片上,1分钟,再以碘溶液(碘片1克、碘化钾2克、蒸馏水配成)冲去结晶紫,并保留碘液约1分钟。

第二步:以酒精洗去碘液并脱色。

第三步:用清水冲洗。

第四步:用中性红溶液(中性红l克、1%醋酸2毫升、蒸馏水30毫升配成)复染2—4分钟,最后用清水冲洗,用吸水纸吸干。

第三镜检:在玻片上染色和透明度都比较好的地方滴香柏油一滴,置显微镜的油镑下观察。

三、全血凝集试验:是一种免疫学检验方法,可用于鸡白痢、伤寒、慢性呼吸道病、传染性滑膜炎等疾病的诊断。方法如下:

取洁净玻片,用红色或蓝色铅笔在上面划几个3.5厘米的格子,以阻挡诊断液和血液扩散。诊断什么病,用什么诊断液。一般诊断液都加染料染成蓝紫色,略有沉淀,同时摇匀,以洁净滴管吸取一滴(约0.05毫升),滴在玻片上一个方格的中央(须滴成圆珠,勿使扩散)。同时将被检鸡翅下静脉刺破,用烧灼过的铂金耳沾取血液(约0.03毫升),加到诊断液上,用火柴杆无火药的一端搅拌。经2一10分钟,如发生凝集反应,即出现很多类似沉渣状小团块,余下是透明液体,可判断为阳性;如未发生凝集反应,即混合液为均匀一致的暗红色,则判断为阴性。试验时,室温及诊断的温度须在20℃以上。

四、琼脂扩散试验:可用于鸡传染件法氏囊病、马立克氏病、传染性脑脊髓炎等疾病的诊断。方法是:取精制琼脂粉1克、氯化钠8克、1%硫柳汞1毫升,加蒸馏水至100毫升,水浴融化,调整pH为7.0—7.4,用纱布夹薄层脱脂棍过滤.向直径8厘米的玻璃乎皿中注入15毫升,自然冷却凝固,即制成琼脂乎板。用时以薄壁金属管在琼脂板上打儿,每组6个儿、中央1孔,直径5毫米,周围5个,直径4毫米,中央孔与周围死距离(孔边与孔边)4毫米,孔深至底。每个平皿的琼脂板上可打孔数组。打好孔后.将破皿底部在垫有石棉网的电炉上稍加热,使琼脂平板略微融化,封住孔底,即可进行试验。

若诊断鸡传染性法氏囊病,在琼脂板中央孔注入阳性血清,周围5孔中,3个孔注人被检鸡的血清,其余2孔注入生理盐水作对照,各孔都要注满而不溢出。

若诊断鸡马立克氏病,在琼脂板中央孔注入阳性血清,周围不打孔,在距中央孔边3毫米处插被检鸡羽髓丰满的羽毛根(剪短,插到底能露出一点即可),每只鸡拔取6根羽毛.剪好插成两组,每组3根。

若诊断鸡传染性脑脊髓炎,在琼脂板中央孔注人该病抗原,周围5孔中,3个孔注入被检鸡血清,其余2孔注人生理盐水作对照。

以上工作完成后,将玻皿置37℃温箱内,经24小时开始观察、一般观察3天,如在中央孔与周围孔之间出现沉淀线,与对照孔之间不出现,则为阳性,否则为阴性。

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